脂质体(liposome)是一种人工膜,是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心),具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点,使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送,还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等,具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例,对其分离纯化方法进行简单的介绍。
样品信息
来自某生物医药公司脂质体,样品呈白色粉末状,纯度98%,想要提高纯度至99.5%,溶解性较差,采用二氯甲烷加甲醇进行超声加热溶解(温度低于60度),且样品紫外吸收较弱,需要连接ELSD进行检测,因此采用SepaBean
machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器进行分离纯化。
实验方案
先采用HPLC液相检测,根据其液相谱图确认进一步分离纯化方法,液相谱图结果为目标产物为 RT=12.918的峰,纯度98.4%,详情如图1所示。
图1.HPLC液相谱图
根据液相方法及结果进行进一步分离纯化的实验参数设置如表1所示。
表1. Flash制备实验参数
结果与讨论

该脂质体类样品由于其溶解性很差,因此降低上样量,上样量110mg,采用120g C18分离柱(40-63 µm, 100 Å, 订货号:SW-8201-120-IR)进行分离纯化。从分离谱图可以看出,该物质紫外吸收较弱需要借助ELSD检测器进行检测,从分离谱图看其分离效果较好,目标组分满足客户检测纯度要求。此次解决方案采用的是三泰科技的键合相系列色谱柱,仪器是SepaBean machine标准型制备液相色谱系统搭配ELSD检测器,为紫外吸收较弱的脂质体类化合物提供更多的分离纯化方案,同时也为其他种类紫外吸收较弱的化合物的分离纯化提供参考。
SepaFlash键合相系列分离柱订购信息
无定形C18,粒径40–63µm,孔径60Å
(碳含量17%,封端,比表面积500m2/g,上样量0.1–2%)

※ 兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。 如需了解更多信息,请访问ChemBeanGo在线商店:https://store.chembeango.com/或者拨打400热线:400-662-9158。
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